檢測高密度脂蛋白對(duì)于血清和組織樣本的處理方法匯總?！

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 樣本處理:

血清(漿)：直接測定，如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測定。 ②、培養(yǎng)液樣本：吸取培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清測定。

 [注]：一般建議細(xì)胞密度在 100萬個(gè)/ml以上。 ③、組織樣本：準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g)：體積(ml)=1：9 的比例，加入 9 倍體積的勻漿介 質(zhì)，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，2500 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清液待測。

 [注]:1、如組織樣本為非高脂樣本，勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進(jìn)行提取。

檢測高密度脂蛋白對(duì)于血清和組織樣本的處理方法匯總?！

 2、如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本，勻漿介質(zhì)可統(tǒng)一用無水乙醇進(jìn)行提取。 

細(xì)胞樣本： A、細(xì)胞收集:將制備好的細(xì)胞懸液取出，1000 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，棄上清液，留細(xì)胞沉 淀；用等滲緩沖液（推薦0.1mol/L 、pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液）清洗1～2 次，同樣1000 轉(zhuǎn)/分，離心10 分鐘，棄上清液，留細(xì)胞沉淀；

 B、細(xì)胞破碎:加入 0.2～0.3ml 的勻漿介質(zhì)（推薦 0.1mol/L、pH7～7.4磷酸鹽緩沖液或生理 鹽水）進(jìn)行勻漿，冰水浴條件下超聲破碎(功率：300W，3～5 秒/次，間隔 30 秒，重復(fù) 3～5  次)或手動(dòng)勻漿，制備好的勻漿液不離心直接測定。也可采用裂解液裂解(推薦 TritonX-100，1～2%，裂解 30～40分鐘)，裂解好的液體不離心直接測定。 

[注]：一般建議細(xì)胞密度在 100萬個(gè)/ml以上。破碎好的液體可顯微鏡觀察細(xì)胞是否破碎* 

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