PRODUCT CLASSIFICATION
產(chǎn)品分類(lèi)DNS 試劑(NY/T 法)操作說(shuō)明
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
DNS試劑(NY/T法)由氫氧化鈉、3,5-二硝基水楊酸、酒石酸鉀鈉、酚等配制而成,DNS濃度為6.3g/L,是植物總糖和還原糖檢測(cè)(硝基水楊酸法)的成分之一,其檢測(cè)原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸,3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物,在一定范圍內(nèi)還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關(guān)系,在540nm處測(cè)定棕紅色物質(zhì)的吸光度,該吸光度值與還原糖含量呈線(xiàn)性關(guān)系,利用比色法和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)測(cè)得樣品中的還原糖和總糖的含量。DNS試劑也常用淀粉酶、纖維素酶、木聚糖酶等的活性測(cè)定。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品名稱(chēng):DNS試劑(NY/T法)
產(chǎn)品貨號(hào):XF0284
規(guī)格:100ml
儲(chǔ)存條件:室溫,避光
有效期:12個(gè)月
用途:農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)法DNS試劑。又稱(chēng)3,5-二硝基水楊酸法或簡(jiǎn)稱(chēng)DNS法,DNS試劑是植物總糖和還原糖檢測(cè)(硝基水楊酸法)的成分之一,定量檢測(cè)植物組織樣品中的總糖和還原糖的含量。3,5-二硝基水楊酸濃度為6.3g/L。
自備材料:
1、蒸餾水、鹽酸溶液、氫氧化鈉溶液
2、剪刀、勻漿器或研缽、50ml 離心管、離心機(jī)、水浴鍋或恒溫箱、分光光度計(jì)、比色皿
操作步驟(僅供參考):
1、還原糖的提?。?/p>
①稱(chēng)取植物樣品 0.5~3g,剪碎,加入蒸餾水約 3ml 勻漿,轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中,用12ml 蒸餾水沖洗研磨器 2~3 次,洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。
②50℃水浴 30min,并不時(shí)攪拌,以便還原糖徹-底浸出。
③將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至 50ml 離心管,4000g 離心。
④留取上清液,向沉淀中加入 20ml 蒸餾水,混勻,再次 4000g 離心。
⑤留取上清液,將 2 次獲得的上清液合并,用蒸餾水定容至 100ml(提取液),混勻,作為還原糖待測(cè)液。
2、總糖的水解和提?。?/p>
①稱(chēng)取植物樣品 0.5~3g,剪碎,加入蒸餾水約 3ml 勻漿,轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中,用12ml 蒸餾水沖洗研磨器 2~3 次,洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。
②向容器中加入 10ml 6M 鹽酸溶液,攪拌均勻,煮沸,并不時(shí)攪拌。
③取 2 滴滴加于載玻片上,滴加 1 滴顯色液,檢查水解是否完-全,如已經(jīng)水解完-全則不顯示藍(lán)色。
④水解完畢后,冷卻至室溫,加入 6M 氫氧化鈉溶液,使溶液 pH 至7.4 左右,用蒸餾水定容至 100ml,混勻,4000g 離心或過(guò)濾,獲得上清或?yàn)V液。
⑤取上清或?yàn)V液 10ml,用蒸餾水定容至 100ml,成稀釋 10 倍的總糖水解液(提取液),取 1ml 總糖水解液,測(cè)定其還原糖的含量。
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