性激素放免檢測試劑盒使用說明
1.樣品測定的準(zhǔn)備：(注意：樣品裂解需在4℃或冰上操作)
對于貼壁細(xì)胞：
吸除培養(yǎng)液，按照6孔板每孔加入200微升裂解液的比例(即相當(dāng)于細(xì)胞培養(yǎng)液量2毫升的1/10)加入裂解液，裂解細(xì)胞。裂解細(xì)胞時為了裂解充分，可以使用移液器進(jìn)行反復(fù)吹打或晃動培養(yǎng)板使裂解液充分接觸并裂解細(xì)胞。通常細(xì)胞在接觸裂解液后會立即裂解。裂解后4℃12000g離心5-10分鐘，取上清，用于后續(xù)的測定。
對于懸浮細(xì)胞：
用離心管離心沉淀細(xì)胞，棄上清，輕輕彈散細(xì)胞，按照6孔板每孔的細(xì)胞量加入200微升裂解液的比例加入裂解液，裂解細(xì)胞。裂解細(xì)胞時為了裂解充分可以彈擊離心管管底或適當(dāng)Vortex使裂解液充分接觸并裂解細(xì)胞。通常細(xì)胞在接觸裂解液后會立即裂解。裂解后4℃12000g離心5-10分鐘，取上清，用于后續(xù)的測定。
對于組織樣品：
按照每20毫克組織加入約100-200微升裂解液的比例加入裂解液，然后用玻璃勻漿器或其它勻漿器進(jìn)行勻漿。充分勻漿可以確保組織被*裂解。裂解后4℃12000g離心5-10分鐘，取上清，用于后續(xù)的測定。
2.標(biāo)準(zhǔn)曲線測定的準(zhǔn)備：
冰浴上溶解待用試劑，把ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液用ATP檢測裂解液稀釋成適當(dāng)?shù)臐舛忍荻?。具體的濃度需根據(jù)樣品中ATP的濃度而定。初次檢測可以檢測0.1、1和10微摩爾/升這幾個濃度，在后續(xù)的實驗中更據(jù)樣品中ATP的濃度對標(biāo)準(zhǔn)品的濃度進(jìn)行適當(dāng)調(diào)節(jié)。
3.ATP檢測工作液的配制：
按照每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品需100微升ATP檢測工作液的比例配制適當(dāng)量的ATP檢測工作液。把待用試劑在冰浴上溶解。取適當(dāng)量的ATP檢測試劑，按照1:100的比例用ATP檢測試劑稀釋液稀釋ATP檢測試劑。例如50微升ATP檢測試劑可以加入5毫升ATP檢測試劑稀釋液配制成5毫升ATP檢測工作液。稀釋后的ATP檢測試劑即為用于后續(xù)實驗的ATP檢測工作液。ATP檢測工作液可在冰浴上暫時保存。
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更新時間：2018-11-10 
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