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細胞核分離試劑盒(蔗糖密度法) 提供優(yōu)惠高品質試劑
產品名稱： 細胞核分離試劑盒(蔗糖密度法)
規(guī)格：50T
用途：分離動物的細胞核
注意事項：
儲存條件：—20℃,6個月
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細胞核分離試劑盒 提供優(yōu)惠高品質試劑
RNA轉錄合成的基本過程:
1.識別:RNA聚合酶中的ζ因子識別轉錄起始點,并促使核心酶結合形成全酶復合物。
位于基因上游,與RNA聚合酶識別、結合并起始轉錄有關的一些DNA順序稱為啟動子。在原核生物中的啟動子通常長約60bp,存在兩段帶共性的順序,即5'-TTGACA-3'和5'-TATAATG-3',其中富含TA的順序被稱為Pribnow盒。真核生物的啟動子中也存在一段富含TA的順序,被稱為Hogness盒或TATA盒。
2.起始:RNA聚合酶全酶促使局部雙鏈解開,并催化ATP或GTP與另外一個三磷酸核苷聚合,形成*個3',5'-磷酸二酯鍵。
3.延長:ζ因子從全酶上脫離,余下的核心酶繼續(xù)沿DNA鏈移動,按照堿基互補原則,不斷聚合RNA。
4.終止:RNA轉錄合成的終止機制有兩種。
⑴自動終止:模板DNA鏈在接近轉錄終止點處存在相連的富含GC和AT的區(qū)域,使RNA轉錄產物形成寡聚U及發(fā)夾形的二級結構,引起RNA聚合酶變構及移動停止,導致RNA轉錄的終止。
⑵依賴輔助因子的終止:由終止因子(ρ蛋白)識別特異的終止信號,并促使RNA的釋放。               真核生物RNA轉錄后的加工修飾:
1.mRNA的轉錄后加工:
⑴加帽:即在mRNA的5'-端加上m7GTP的結構。此過程發(fā)生在細胞核內,即對HnRNA進行加帽。加工過程首先是在磷酸酶的作用下,將5'-端的磷酸基水解,然后再加上鳥苷三磷酸,形成GpppN的結構,再對G進行甲基化。
⑵加尾:這一過程也是細胞核內完成,首先由核酸外切酶切去3'-端一些過剩的核苷酸,然后再加入polyA。
⑶剪接:真核生物中的結構基因基本上都是斷裂基因。結構基因中能夠指導多肽鏈合成的編碼順序被稱為外顯子,而不能指導多肽鏈合成的非編碼順序就被稱為內含子。真核生物HnRNA的剪接一般需snRNA參與構成的核蛋白體參加,通過形成套索狀結構而將內含子切除掉。
⑷內部甲基化:由甲基化酶催化,對某些堿基進行甲基化處理。
2.tRNA的轉錄后加工:主要加工方式是切斷和堿基修飾。
3.rRNA的轉錄后加工:主要加工方式是切斷。
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