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文章標(biāo)題《載血管生長(zhǎng)因子殼聚糖納米粒在防治放射性皮膚損傷中的應(yīng)用及其作用機(jī)制的探討》
文章中引用我司試劑盒如下:
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文章詳細(xì)內(nèi)容如下:
目的:制備載有血管生長(zhǎng)因子的殼聚糖納米粒并探討其在放射性皮膚損傷中的應(yīng)用及其作用機(jī)
制。方法:(1)大鼠臀部接受45Gy X射線照射建立放射性皮膚損傷模型,觀察大鼠輻射區(qū)的大體改
變和微循環(huán)狀態(tài)隨時(shí)間的變化。(2)將血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth
factor,VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)
因子(hepatocyte growth factor,HGF)分別局部皮下注射應(yīng)用于放射性皮膚損傷大鼠模型,對(duì)比
大鼠模型的大體觀、微血管計(jì)數(shù)及一步法TUNEL凋亡染色,篩選出治療效果*的血管生長(zhǎng)因
子。(3)三聚磷酸鈉(tripolyphosphate,TPP)、殼聚糖(chitosan,CS)與篩選出的血管生長(zhǎng)因子結(jié)
合,離子交聯(lián)法制備成納米粒,檢測(cè)其理化性質(zhì),探討其體外釋放規(guī)律。(4)將配制成的載血管生長(zhǎng)
因子殼聚糖納米粒干燥重懸后,局部皮下注射入大鼠輻射部位,對(duì)比等量血管生長(zhǎng)因子連續(xù)注射及
一次性注射的給藥方式,觀察電離輻射區(qū)皮膚變化,初步評(píng)價(jià)其對(duì)放射性皮膚損傷發(fā)生發(fā)展及愈合
的影響。(5)通過(guò)對(duì)比各組微循環(huán)狀態(tài)、血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷標(biāo)志物血管性血友病因子(von
Willebrand Factor,vWF)含量與細(xì)胞凋亡蛋白caspase3表達(dá)程度,進(jìn)一步探討其在放射性皮膚
損傷中的作用機(jī)制。免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)、免疫印跡法(Western
blotting)對(duì)血管生長(zhǎng)因子定性定量驗(yàn)證。結(jié)果:(1)大鼠經(jīng)45Gy X射線照射后,2周脫毛,4周皮膚
形成潰瘍,兩個(gè)月潰瘍創(chuàng)面逐漸愈合,隨時(shí)間變化微循環(huán)障礙逐漸加重。(2)輻照后兩周,VEGF組輻
照區(qū)未見(jiàn)明顯變化,而bFGF組和HGF組部分脫毛,VEGF組可見(jiàn)較多微血管且較少的凋亡細(xì)胞,差異
有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。(3)采用離子交聯(lián)法制備的載VEGF165殼聚糖納米粒粒徑400nm左
右,Zeta電位25.3V,包封率85%左右,體外可平穩(wěn)釋放30天,釋放率達(dá)90%。(4)VEGF165以納米顆
粒的形式注射應(yīng)用于體內(nèi)后,其脫毛、潰瘍形成所需的天數(shù)與以連續(xù)注射的方式相當(dāng),兩者間差異
不顯著(P>0.05),但明顯多于對(duì)照組及一次性注射的用藥方式(P<0.01),創(chuàng)面愈合所需天數(shù)較其他
三組少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(5)VEGF165以納米顆粒及連續(xù)注射的方式應(yīng)用后兩周開(kāi)
始,微血管計(jì)數(shù)和vWF含量多于對(duì)照組和一次性單純注射VEGF165組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
(P<0.01);caspase3表達(dá)程度弱于對(duì)照組和一次性單純注射VEGF165組。經(jīng)驗(yàn)證,VEGF165以納
米顆粒及連續(xù)注射的方式應(yīng)用后,組織內(nèi)VEGF165的含量明顯多于對(duì)照組和一次性單純注射
VEGF165組。結(jié)論:(1)當(dāng)X射線放射劑量為45Gy時(shí),大鼠可形成明顯的皮膚損傷創(chuàng)面,微血管損傷
與微血栓形成隨時(shí)間程度逐漸加深,具有長(zhǎng)期性、持久性、潛在性和進(jìn)行性作用的特征。
(2)VEGF165能夠有效地延緩大鼠模型放射性皮膚損傷的發(fā)生發(fā)展。(3)離子交聯(lián)法制備的載
VEGF165殼聚糖納米粒,不僅具有較高的包封率,而且理化性質(zhì)穩(wěn)定,體外釋放平穩(wěn),并且在大鼠模
型體內(nèi)起到了一定的緩釋作用,實(shí)現(xiàn)了VEGF165的可持續(xù)作用。(4)載VEGF165殼聚糖納米???/span>
能是通過(guò)保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞,抑制內(nèi)皮細(xì)胞凋亡,防止血栓形成,延緩放射性皮膚損傷的發(fā)生發(fā)展,
并且促進(jìn)放射性皮膚損傷的愈合。
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